时间:2024-11-07 14:02:03
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基因敲除的原理和方法
基因敲除的原理是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失。主要应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。基因敲除的方法包括:
1. 利用基因同源重组进行基因敲除:外源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,从而代替受体细胞基因组中的相同/相似的基因序列,整合入受体细胞的基因组中。
2. 利用随机插入突变进行基因敲除:利用某些能随机插入基因序列的病毒、细菌或其他基因载体,在目标细胞基因组中进行随机插入突变,建立一个携带随机插入突变的细胞库,然后通过相应的标记进行筛选获得相应的基因敲除细胞。
3. RNAi引起的基因敲除:通过RNA干扰技术,抑制特定基因的表达,从而达到基因敲除的目的。
基因敲除技术在生物医学研究、动物模型的建立等方面有广泛的应用。